支原体检测试剂盒

2025-08-01

一.试剂盒说明 支原体(myc):支原体是一种大小仅为0.2~0.3 um,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 um)的原核生物,在细胞培养过程中,发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。因此细胞都需要定期(如每个月)进行支原体污染的检测。检测支原体的方法包括肉汤或培养、 ELISA、直接或间接的荧光染色、PCR法等,其中, PCR法灵敏度最高(可检测10个拷贝DNA)。本试剂盒能检测支原体种类包括 M.等多种常见支原体,在细胞污染中这些种支原体占到99%以上的比例。本产品克服了PCR反应配置过程中的繁琐程序,通过加入抑制非特异性结合的,有效的整合了所有PCR反应成分,实现了一步法PCR技术新的突破 三. 操作步骤 反应体系: Myco-PCR-Mix 18ul 待检测细胞上清液 2ul 按照以上反应比例,在PCR管中将待检测样品上清液 2ul加入到18ul Myco-PCR-Mix中,每次检测请用Positiv模版作为阳性对照,用Negative 模版作为阴性对照。PCR反应程序为:95℃ 5min,(95℃ 30s,55℃ 45s,72℃ 45s)36 个循环,72℃ 5min, 10℃ 保存。PCR产物跑1.5 % 胶,用DL2000的DNA Marker显示片段大小。待检测样品中如果出现与阳性对照大小一致(450-600 bp)的条带,说明样品被。 产品仅供使用说明:仅供科研使用。
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